Анализ на грибок ногтей и кожи: лабораторная диагностика микозов

Выявить поражение и определить возбудителя при поражении грибка на первых этапах крайне сложно. Диагностирование осложнено тем, что патология сразу никак не проявляется или имеет разнообразную симптоматику. Для определения возбудителя берут биоматериал с того участка, который поразила патогенная микрофлора: мокроту, часть кожи, зараженный ноготь, кровь, биопсию лимфоузлов или внутренних органов.

Что такое грибковые заболевания

Эта группа патологий носит общее название микозы, которая характеризуется поражением паразитов внутренних органов, кожных покровов, ногтей рук и ног (онихомикоз), может нанести серьезный вред здоровью пациента. Возбудителями выступают грибковые бактерии (относятся к царству «грибы»). Большая часть этой флоры благоприятно влияет на здоровье человека, сосуществуя с ним в гармонии. Некоторые же из них могут вызывать развитие заболеваний, которые нанесут существенный вред, поэтому важно выявить начать лечение проблемы максимально быстро.

Как выглядит

Причиной обращения к дерматологу становятся, как правило, первые патологические проявления болезни. Клинические признаки будут отличаться в зависимости от места заражения, возбудителя грибкового заболевания. Выделяют следующие типы патогенных микроорганизмов:

  • грибок Кандида (Candida) – вызывает кандидозные инфекции;
  • Трихофитии (Trichophyton) – провоцирует инфекционные патологии ногтей, кожи, слизистых оболочек;
  • Криптококкоз – атакует внутренние органы, легкие;
  • Аспергиллез – грибковое заболевание, вызванное снижением иммунитета.

При диагностике может быть определена одна из 2 групп инфекции по локализации:

  1. Поверхностное. Выявляется поражение кожи, слизистых, распространение на внутренние органы не происходит (инфекции, которые вызваны грибками рода трихофитии, кандида).
  2. Системное. Определяется при поражении внутренних органов, диссеминации паразитов с кровью (аспергиллез, криптококкоз).

Возбудители инфекции

Проникает патогенная микрофлора через ранки на поверхности эпидермиса, микротравмы, причиной заболевания может стать любая царапина, которая спровоцирует микоз гладкой кожи. Не справляется организм с атакой возбудителя при снижении защитных функций. При диагностике часто определяют заражение родом трихофитон или Кандида. Последние вызывают такие заболевания:

  • молочница;
  • кандидоз у мужчин;
  • кандидоз ротовой полости.

Существует более нескольких десятков возбудителей, их делят по методу поражения тканей. При диагностике могут выявить следующие виды грибковых микроорганизмов:

  • глубокие системные микозы провоцирует Histoplasma capsulatum;
  • субкутанные подкожные микозы вызывает Sportrichum schenckii;
  • эпидермомикозы развиваются из-за Epidermophyton floccosum;
  • отрубевидный лишай, поверхностный микоз — Malassezia furfur;
  • оппортунистические грибковые заболевания — Candida albicans.

Классификация микозов

Общее название всех болезней этого типа скрывает под собой разные виды поражения организма человека грибами. При диагностике врачи разделяют заболевания кожи на 4 группы:

  1. Кератомикозы. Местом локализации становится роговой слой эпидермиса, в других слоях кожи воспалительные явления отсутствуют (пьедра, разноцветный лишай, парша, споротрихоз). Вызывают эту разновидность патологии следующие грибы: Sporotrichium, Trichosporon, Piedraia, Exophiala, Pityrosporum.
  2. Дерматомикозы. Характеризуются выраженным воспалительным процессом, локализуются на коже, волосистой части головы, на ногтях (фаус, трихофития, эпидермофития, микроспория). Провоцируют патологии следующие штаммы грибов: Epidermophyton, Microsporum, Trichophyton.
  3. Кандидамикозы. Затрагивает этот вид грибков слизистые оболочки, кожу и ее придатки. Часто объектом атаки грибков рода Кандида становятся внутренние органы.
  4. Глубокие микозы. Провоцируют тяжелые заражения всех слоев кожи, внутренних органов, слизистых оболочек, костей, мышц (мукороз, пенициллиоз, аспергиллез).

Выделяют отдельно псевдомикозы (актиномикоз, эритразма), которые не являются заболеваниями грибкового типа, но по симптомам схожи с истинными микозами. В этих случаях обязательно нужна дифференциальная диагностика. Диагностика в таких случаях очень важна, потому что помогает определить тип грибкового поражения или исключить его. От этого зависит назначения схемы лечения, ее длительность и эффективность.

Дерматомикозы

Грибки-дерматофиты глубокого проникаются в кожу, провоцируют дерматомикозы, к примеру, следующие известные патологии:

Относят этот вид патологии к разным болезням, которые создают рубцовые изменения, деформацию кистей рук, ногтей стоп, изменение структуры и выпадение волос. Поражают возбудители верхние, глубокие слои кожи, что приводит к появлению фурункулоподобных узлов, пустулезных высыпаний, обширных очагов воспаления. Для развития благоприятным условием становится нарушение гигиены стоп. Сначала грибок растет на коже ног, в межпальцевых промежутках, затем переходит на ногти.

Патогенные микроорганизмы поражают глубокие и поверхностные слои кожи, распространяются на ногти, волосы, внутренние органы. Вызывают болезни грибы рода Кандида, болезни относятся к группе кандидамикозов. Выделяют следующие типы этих недугов:

  • генерализованные;
  • поверхностные;
  • висцеральные.

Относятся грибы Candida к условно-патогенным. Дрожжеподобные возбудители можно обнаружить при диагностике в кишечнике, ротовой полости и у здорового человека. Сдерживает распространение патогенных микроорганизмов сильный иммунитет, а при его ослаблении начинается активное размножение кандид, что приводит к поражению кожного покрова туловища, ступней, головы, кистей. Клинические изменения отмечаются при всех типах кандидамикозов. Лечение зависит от тяжести течения, вида поражения.

Глубокий микоз

Это вид заболеваний, которые затрагивают глубокие слои кожи, внутренние органы. Болезни развиваются при сильном снижении защитных сил организма, изменении гормонального фона, нарушении обмена веществ. Относят следующие патологии к глубоким микозам:

  • кокцидиоидоз;
  • хромомикоз;
  • риноспоридиоз;
  • гистоплазмоз;
  • споротрихоз;
  • бластомикоз;
  • мукороз;
  • цефалоспориоз;
  • мицетома;
  • кладоспориоз;
  • мадурская стопа;
  • аспергиллез.

Кератомикоз

Это группа патологий, которые локализуются только на кутикулах волос, роговом, поверхностном слое кожи. Характерным признаком кератомикоза становится отсутствие воспалительных явлений. Возбудителями болезни являются плесневелые, дрожжеподобные грибы, дерматофиты (около 70 видов патогенов). Провоцируют они следующие заболевания:

  • шимбери;
  • белый лишай;
  • черный лишай;
  • черепицеобразный микоз;
  • тропический белый и желтый лишай;
  • узловатая трихоспория;
  • пьедра;
  • разноцветный (отрубевидный) лишай.

Как диагностировать грибок

При подозрении на развитие микоза нужно сразу же обратиться за медицинской помощью. Вам понадобится врач дерматолог или миколог. Диагностика грибка ногтей начинается с опроса пациента, чтобы выявить возможные пути заражения. Специалист спрашивает про контакт больного с птицами, животными, которые могут переносить паразитов. Важно уточнить не был ли человек в неблагоприятных регионах других стран, в каких условиях он живет.

Далее начинается визуальный осмотр, который помогает определить масштабность поражения, какие участки поверглись воздействию грибков. Врач должен обратить внимание на наличие иммунодефицитного состояния пациента. Для определения типа возбудителя необходимо сделать забор материала, который отправляют на лабораторное исследование. Опытный врач может при первичном осмотре поставить диагноз, но для составления схемы терапии нужно все равно провести изучение биоматериала. Для диагностики грибковых заболеваний применяют следующие методы:

  • микроскопия – исследование под микроскопом биоматериала, распространенный и простой метод диагностики;
  • исследование под лампой Вуда – специальный спектр ультрафиолетового освещения (люминесценция) помогает заметить грибковые поражения;
  • бактериологический посев – точный способ диагностики, но проведение его занимает 2-3 недели, пока не вырастет колония на питательной среде;
  • ПЦР-диагностика – самый точный способ определения вида патогенной микрофлоры, но для точного диагноза может потребоваться проведение нескольких анализов, что требует траты денег.

Лабораторные методы

Только своевременный точно поставленный диагноз поможет назначить эффективную схему терапии и сократить длительность курса. Лабораторная диагностика грибковых заболеваний является самым эффективным методом для определения типа возбудителя. Для выявления используют такие варианты исследования:

  • бактериологический посев;
  • гистологический анализ;
  • ПЦР-диагностирование;
  • иммунологическое исследование;
  • микробиологические исследования;
  • культкуральное исследование.

Дифференциальная диагностика микозов

Постановку точного диагноза затрудняет то, что при разных видах микоза появляются различные симптомы. В таких случаях используют дифференциальный метод диагностики, сравнивают с другими дерматологическими патологиями микоз. Часто признаки микоза путают с псориазом, но при соскабливании чешуек грибковая патология не будет кровоточить. Схожая симптоматика наблюдается и с парапсориазом.

Врач должен исключить вероятность развития нуммулярной экземы. Это особый вид патологии, который можно выявить только при лабораторной диагностике. Часто признаки грибка принимают за полиморфный фотодерматоз, который может развиваться только у взрослого человека и никогда не встречается у ребенка. Лабораторная и дифференциальная диагностика обязательна для постановки точного диагноза, назначения грамотного лечения.

Микробиологическая диагностика микозов

Это самый простой и распространенный метод выявления микоза на коже и в крови. Для точного диагноза необходимо собрать материал для исследования. При поражении волосистой части головы нужно при помощи пинцета собрать пораженные волосы, а с кожи сделать соскоб поврежденного участка. Лабораторные исследования при грибковых заболеваниях по микробиологическому методу проводятся при помещении биоматериала в раствор гидроксида калия 30%, потом на предметное стекло.

Анализ поможет вывить, где расположен грибок (снаружи или внутри кожи, волоса), его размеры. Если забор материала провести неверно, то анализ может дать ошибочный результат. Используют для диагностики следующие методы микробиологической диагностики:

  • микроскопия с нативными и неокрашенными препаратами;
  • микроскопия с окрашенными препаратами.

Методы исследования

При диагностике специалист должен учитывать структуру мицелия (строение гиф, их септированность, цвет), особенности строения спор, кондиев, учитывается их цвет, форма и размер, строение клеточной стенки и т.д. Для исследования готовят нативные, окрашенные препараты. Последние требуют обработки материала разными способами:

  1. PAS-окрашивание. Окраска такого типа помогает определить в стенках микроорганизмов нейтральные полисахариды. К ним относится глюкан-маннановый комплекс, который находится в клеточной стенке многих эумицетов. Он и провоцирует процесс окрашивания.
  2. PAS-реакция. Используется для диагностики грибковой инфекции тканевой формы. В лаборатории применяют для этого исследования разные модификации, к примеру, окраска по Гридли или реакция Бауэра.
  3. Метод Грама. Окраска этим способом помогает выявить наличие сопутствующих микрорганизмов.
  4. Окраска по Циль-Нильсону. Помогает определить кислотоустойчивые микроорганизмы. Если биоматериал жидкий, то готовят специальный неокрашенный мазок в просветляющих жидкостях для микроскопии: в равных пропорциях смешивают глицерин и спирт.

Культуральное исследование на грибы

Помещают посев биоматериала на питательную среду (выращивание), чтобы выделить чистую культуру при комнатной температуре. Диморфные грибы в таких условиях образуют мицелий, при росте до 37 градусов начинают формироваться дрожжеподобные клетки. Среда Сабуро применяется для дерматофитов и грибов Candida, для плесневелых (гифальных) необходима среда Чапека. Часто добавляют в состав антибиотик. Глубокие микозы могут определить только в клинико-лабораторных центрах из-за высокой контагиозности.

Это интересно:  Сколько стоит микозан от грибка ногтей цена

Люминесцентная диагностика грибковых заболеваний

Для определения пораженных участков кожи патогенной микрофлорой рода Микроспорум используют ультрафиолетовую лампу. Это вариант экспресс-диагностики, которая применяется при необходимости подтвердить наличие кожной инфекции, симптомы лишайных заболеваний. Ультрафиолетовое излучение не является главным способом определения грибка, это вспомогательный метод, поэтому выполнять его не обязательно.

Для осмотра больного используют лампу Вуда, они испускает УФ излучения, под их действием продукты жизнедеятельности грибка светятся ярким светом. Цвет зависит от того, какой вид возбудителя поразил пациента:

  • зеленоватый – лишай волосистой части головы;
  • голубой – красная волчанка на губах;
  • желтоватый – плоские лишайные образования.

Иммунологический ферментный анализ крови на грибок

Для обнаружения микозов, поразивших кожные покровы, внутренние органы (гистоплазмоз, кокцидиоидоз) используют иммунологический ферментный анализ крови на грибковые заболевания. Часто используют эту методику в случае, если взять биопсию тканей для изучения по определенным причинам не получается. Основывается методика на поиск титра антител к конкретному типу грибкового заболевания.

Для этих целей используют определение IgG к аспергиллезу, кандидозу. Точность анализа составляет около 80%, в редких случаях можно получить ложноположительный результат при отсутствии глубоких микозов. Случается это при наличии у больного грибка слизистой оболочки рта или запущенной формы молочницы. Для ИФА требуется забор венозной крови, берут его утром рано или, спустя 4 часа после последнего приема пищи. Другой подготовки для проведения анализа не требуется.

Ответ на анализ будет через несколько суток после забора биоматериала. Редко длительность ожидания превышает 5 дней. Влияет на скорость проведения исследования качество оборудования в лаборатории, если есть причины провести дополнительное изучение образцов крови. Пациенту выдают по завершении процедуры заключение, где будет указано одно из значений:

  • при подтверждении наличия грибка будет написано «положительный результат»;
  • при отсутствии полной уверенности, что был обнаружен грибок в крови, пишут «сомнительный результат»;
  • при отсутствии патогенной микрофлоры в образце биоматериала пишут «отрицательный результат»;
  • при наличии хорошего оборудования при исследовании крови могут определить концентрацию клеток микоза и указать показатель в заключение.

ПЦР-диагностика грибковых заболеваний

Самым точным и достоверным способом диагностики грибка и других инфекционных заболеваний является полиразмерная цепная реакция. Обладает метод диагностики следующими преимуществами:

  • низкая стоимость анализа;
  • высокая точность;
  • исследование биоматериала проводится быстро;
  • для анализа можно собрать любой образец тканей (частичку кожи, слизистой, соскоб с подошвы стоп, пальцев рук, поверхности ногтей, волосы, кровь).

Главный недостаток этого исследования – узкая направленность. Чтобы диагностировать микоз, нужно точно знать, где он поразил организм человека. ПЦР определяет тип возбудителя, концентрацию в организме больного. Результаты будут известны через сутки, в некоторых случаях (при отсутствии неблагоприятных условий), ответы приходят в день сдачи (через 5-6 часов). Скорость выполнения исследования зависит от правильности забора образца, опытности медперсонала, загруженности работой лаборатории.

Как определить грибок в домашних условиях

При умении распознать симптоматику микозных патологий и применении домашних методов диагностирования, можно определить вид патогена. Пациент должен правильно оценить течение болезни, можно на первых этапах грибковое заболевание спутать с псориазом или лишаем. Чтобы этого избежать, нужно знать основные признаки микоза, которые отличают его от других недугов. Симптомы поражения грибком:

  • ногти становятся желтого цвета, начинают слоиться;
  • изменение формы ногтевой пластины;
  • нет периодов ремиссии и обострения, начинается полное отслоение пластины, что не происходит при кожных патологиях и псориазе;
  • место поражения имеет неприятный запах, болит при прикосновенно, появляется зуд, шелушение, могут образовываться бляшки на поверхности кожи;
  • поражает грибок, как правило, межпальцевые промежутки на одной или обеих ногах, затем недуг распространяется на ноготь и остальную ступню.

Диагностика грибка ногтей на ногах с помощью перманганата калия

Если вы заметили, что ногти на руках, ногах начали видоизменяться, появился неприятный запах, то можно прямо дома проверить наличие или отсутствие инфекции. Вам понадобится для проведения анализа марганец, теплая вода и емкость. Процедура проводится следующим образом:

  1. Сделайте слабый раствор марганцовки.
  2. Погрузите руки или ноги (пораженные конечности) на 2-3 минуты в емкость.
  3. Если ногтевая пластина окрасилась в желтый цвет – вы здоровы. Если же окраска их не изменилась, значит есть инфекция.

Проба йодом на лишай

Это средство легко найти в аптеке и есть у большинства людей дома. Определить сам грибок йод не поможет, но может помочь определить наличие кожных патологий на начальном этапе развития. К примеру, средство помогает выявить отрубевидный лишай, которые поражает кожу на руках и ногах. Проводится исследование следующим образом:

  • при наличии признаков кожного заболевания нанести тонким слоем йод на этот участок;
  • подождите 2 минуты;
  • если проблема есть, то очаги поражения примут насыщенный окрас;
  • здоровые участки кожи выделять не будут.

Все о лабораторном анализе на грибок ногтей и кожи

Грибковые инфекции (микозы) заняли третью позицию в списке наиболее распространенных дерматологических заболеваний. Они не относятся к трудноизлечимым болезням, но борьба с ними занимает много времени и требует квалифицированной помощи. Чтобы подобрать правильную терапию и избавиться от микоза навсегда, надо пройти лабораторную диагностику. Это комплекс обязательных процедур, которые позволят установить вид возбудителя грибковой инфекции и степень запущенности болезни. Направление на сдачу анализов выдает дерматолог, он же назначает курс лечения.

Методы анализа микоза ногтей, кожи и слизистых оболочек

Для лабораторной диагностики грибковой инфекции пациенту необходимо сдать биологический материал. Это может быть:

  • соскоб с кожи;
  • слизистые выделения;
  • волос;
  • частичка ногтевой пластины;

Некоторые виды диагностических мероприятий позволяют использовать любой из перечисленных биоматериалов, но большинство методик требуют взятия твердого образца, например, кусочка кожи, ногтя или слизистой.

Для определения типа микоза, концентрации и степени его запущенности прибегают к таким методам:

  • микроскопия;
  • иммуноферментный анализ (ИФА);
  • полимеразно-цепная реакция (ПЦР).

Также иногда врач назначает посев на обнаружение патогенной микрофлоры или люминесцентную диагностику (ЛД). Эти способы анализа грибка не могут использоваться в качестве основных и являются вспомогательными. К ним обращаются в случае неясных результатов микроскопии, ИФА или ПЦР для более точной постановки диагноза.

Особенности микроскопии

Микроскопия (микробиологический анализ) – самый распространенный, но малоэффективный метод диагностики. Для исследования на грибок у пациента берется срез ногтя, соскоб с кожи или кусочек волоса (если у больного по предварительному диагнозу обнаружен микоз волосистой части головы). Далее биоматериал помещается в лабораторный контейнер (стерильная емкость небольшого размера с плотной крышкой). Он может выдаваться на месте взятия образца тканей или же его потребуется приобретать самостоятельно. Зависит от того, где берут пробу на микоз. В частной лаборатории контейнер выдают на месте, обычно бесплатно, а в государственной больнице надо принести свой.

Суть метода диагностики заключается в визуальном обнаружении грибковой инфекции. Для этого частичка биоматериала помещается в специальный раствор, расслаивается и исследуется при помощи увеличительного оборудования. Работник лаборатории тщательно рассматривает образец ткани и выявляет в нем патогенную микрофлору.

Недостатком этого способа анализа стала низкая эффективность. Порой, результаты ложные. Грибок не обнаруживается, но он есть. Назначают микроскопию при запущенной болезни или же тогда, когда у пациента нет возможности оплатить высокоточную лабораторную диагностику. В первом случае результаты исследования зачастую правдивы до 80%. Это объясняется тем, что при запущенной стадии развития микоза количество клеток патогенной микрофлоры слишком большое и не обнаружить их практически невозможно.

Несмотря на то, что микроскопический метод не всегда дает правдивые ответы, у него есть масса преимуществ:

  • быстрота получения результата анализа;
  • низкая цена (в государственных больницах его делают бесплатно);
  • позволяет выявить все виды грибковой инфекции;
  • можно использовать любой вид биологического материала.

Что нужно делать перед сдачей анализа

Чтобы микроскопия дала максимально точные результаты, нужно подготовиться к сдаче биоматериала. За неделю до похода в лабораторию требуется прекратить принимать антибиотики. Это обязательное правило, игнорировать которое нельзя.

Если в качестве образца будет взята моча, то недопустимо пить большое количество жидкости накануне. Лучше всего собрать урину сразу после пробуждения, в день сдачи анализа.

Если пациент – женщина, то проходить диагностику надо через 3-4 для после окончания менструального цикла.

Когда проводят анализ на грибок ногтей, нужно убрать с их поверхности все химические покрытия. Это касается как лечебных, так и декоративных лаков.

Если для исследования используется кусочек дермы, волос или соскоб со слизистой оболочки, то место взятия тканей запрещено обрабатывать антисептиками, косметикой и другими средствами за сутки до похода в лабораторию.

Анализ крови на грибок в организме методом ИФА

Иммуноферментный анализ позволяет выявить концентрацию грибковых клеток в организме и вид возбудителя заболевания. В качестве образца для исследования используют кровь пациента, которую забирают из вены непосредственно перед проведением диагностики.

ИФА в основном используется для обнаружения микоза, поразившего внутренние органы. Но также метод назначается при подозрении на кандидоз (грибок в интимной зоне, молочница) и поражение кожных покровов болезнетворными микроорганизмами. Иммуноферментный анализ на онихомикоз не выполняется, однако ее можно провести, если помимо ногтя поражены стопы на ногах.

К плюсам ИФА-метода надо отнести:

  • высокую чувствительность и точность показателей (до 95%);
  • быстроту получения результатов;
  • возможность проведения диагностики на начальной стадии развития микоза;
  • доступность.

Кроме того, иммуноферментный анализ на грибок позволяет следить за динамкой инфекционного заболевания, что пригодится для корректировки медикаментозной терапии в дальнейшем.

К минусам данного вида диагностики относится небольшая вероятность получения ложных положительных или отрицательных результатов. В этом случае назначается дополнительное исследование. Для повторного анализа кровь берут заново.

Как подготовить себя к ИФА

Прежде чем сдавать кровь на иммуноферментную диагностику пациент должен:

  • не курить и не принимать алкогольные напитки за трое суток;
  • за неделю прекратить прием антибактериальных, антимикотических и противовирусных средств;
Это интересно:  Средство от ногтевого грибка на ногах недорогое

  • приостановить лечение симптомов грибка препаратами местного действия;
  • исключить физические нагрузки за сутки до забора крови;
  • не есть жирной и сладкой пищи за 5 часов.

Полимеразно-цепная реакция

ПЦР диагностика микозов основана на исследовании структуры ДНК патогена, и используется для выявления инфекции вне зависимости от места ее локализации и степени развития. При помощи методики можно с точностью выявить вид возбудителя болезни, его концентрацию в организме и стадию.

Полимеразно-цепную реакцию часто назначают при грибке ногтей, микозе волосистой части головы и инфекциях, поразивших слизистые оболочки половых органов, гортани.

Положительными особенностями метода диагностики является:

  • возможность использовать любой тип тканей (ногти, волосы, соскоб, биологические жидкости);
  • безболезненность забора образца для исследования;
  • результаты становятся известными в течение дня (если забор тканей произведен утром);
  • высокая точность (до 98%);
  • выявление сразу нескольких видов инфекции.

К недостаткам ПЦР относится только большая стоимость. Также услугой нельзя воспользоваться в лаборатории при государственной больнице. Сдать анализ можно в приватной клинике или крупном медцентре.

Подготовительные мероприятия к ПЦР

В отличие от ИФА и микроскопии, полимеразно-цепная реакция не требует серьезной подготовки. Перед сдачей образца тканей нужно отказаться от алкоголя и сигарет. Также надо приостановить прием противогрибковых средств на неделю. Это касается как таблетированных, так и местных препаратов.

Дополнительная диагностика грибковых заболеваний

Прохождение дополнительного исследования актуально только тогда, когда основные методы диагностики дали результат, не позволяющий точно определить наличие грибка или его тип. Обычно необходимость в этом возникает в трех случаях:

  • когда концентрация патогена в биоматериале незначительная;
  • когда анализ тканей был выполнен в несоответствии с требованиями;
  • когда нет возможности воспользоваться более точным способом диагностики (например, там, где проживает больной, нет клиник, предоставляющих услуги по проведению ПЦР).

Вспомогательные методы исследования биоматериала не могут дать 100% точный ответ. Они всего лишь подтверждают или опровергают результаты предыдущего анализа. Принимать решение о том, нужно ли проходить дополнительную диагностику, должен только врач, но пациент может отказаться от нее.

Люминесцентная диагностика грибка

Люминесцентный анализ основан на «просвечивании» пораженных участков тела при помощи УФ-лампы, которая называется прибором Вуда. Ультрафиолетовые лучи влияют на патогенную микрофлору и заставляют ее светиться. Так обнаруживается грибок.

В ходе исследования лампа направляется на зону локализации патогена и по характеру свечения определяется ее тип:

  • губы, пораженные болезнью Либмана (системная красная волчанка), светятся голубовато-зеленым светом;
  • плоские лишайные бляшки проявляются желтоватым свечением;
  • грибок в волосах светится ярко-зеленым светом.

К сожалению, не все виды болезнетворных микроорганизмов реагируют на свечение лампы Вуда и не обнаруживаются в ходе люминесцентной диагностики. Поэтому процедура назначается только при подозрении на заражение грибами рода Microsporum. Эта разновидность микозов известна всем под названием «лишай». Она поражает кожные покровы и волосистую часть головы.

Подготовка к ЛД

Перед походом на «просвечивание» инфицированного участка запрещено мыть кожу антибактериальными средствами. Также нельзя обрабатывать ее спиртовым раствором, противовирусными мазями и антимикозными препаратами. Это приводит к гибели патогенной микрофлоры, поразившей верхний слой дермы, из-за чего свечение грибка станет слабым или будет отсутствовать вовсе.

Микологический посев

Микологический посев часто называют культуральным способом диагностики грибков. Он дает точные данные относительно вида и концентрации патогенных микроорганизмов в структуре эпидермиса или ногтевой пластины.

Забор тканей осуществляется в лабораторных условиях по принципу микроскопии. Соскоб на грибок ногтей или эпидермиса помещается в стерильную емкость и передается для исследования специалисту.

По сути, микологический посев – это аналог микроскопического анализа. Разница между ними заключается в том, что при культуральной диагностике образец помещается в особую питательную среду, которая приводит к активному размножению грибковых спор. В жидкости-реагенте образуются целые колонии болезнетворной микрофлоры, они извлекаются и рассматриваются под микроскопом.

При необходимости сотрудник лаборатории соединяет грибки с лекарственными препаратами и следит за реакцией микроорганизма. Это позволяет узнать, на какие вещества реагирует патоген, и дает возможность подобрать правильную терапию.

Как подготовиться к посеву

Подготовка к культуральному анализу требует:

  • отказа от обработки пораженной зоны противогрибковыми препаратами, антисептиками и антибактериальными средствами;
  • прерывания грибковой терапии, даже если она назначена врачом.

Также желательно отказаться от спиртного за несколько суток до сдачи анализа, но особой необходимости в этом нет. Однако надо помнить, что высокая концентрация этанола в организме влияет на точность результатов анализа.

Видео в тему

Анализ на грибок ногтей и кожи: лабораторная диагностика микозов

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА МИКОЗОВ

Взятие материала для лабораторного исследования на грибок.

Подготовка процедурного кабинета:

Приготовить:
-1%р-р хлорамина для ветоши
-3%р-р хлорамина – для дезинфекции перевязочного материала и пинцетов
— моющий р-р (156 мл. перекиси водорода + 5 г. моющего порошка + 839 мл. дисцилированной воды) — для обработки пинцетов
— 6% р-р перекиси водорода – для обработки перчаток.

Алгоритм выполнения манипуляции.

— нужно взять пинцет, предметное стекло, ложку фолькмана, ножницы;
— пациента пригласить в перевязочную;
— пациент сидит на стуле или кушетке;
— м/с стоит.

Техника выполнения:

— из очага поражения пинцетом взять чешуйки кожи и волосы;
— взятый материал положить на предметное стекло и закрыть другим предметным стеклом.
— вымыть руки с мылом;
— взятый материал отправить в лабораторию.

СБОР МАТЕРИАЛА

Взятие ногтей на исследование.

— взять ножницы и предметные стекла;
— ножницами отрезать кусочек от свободного края ногтя;
— взятый материал покрыть другим предметным стеклом;

Правильный сбор материала из пораженных ногтей — залог успешного микробиологического исследования. Забирая материал, не всегда захватывают участки ногтя, содержащие жизнеспособные грибы. Нежизнеспособные грибы в культуре, естественно, не вырастут, и их вид установить не удастся.

Участок ногтя, который надо взять, определяется формой онихомикоза.

Так, при поверхностной форме онихомикоза следует делать соскобы с поверхности ногтевой пластинки.

При самой распространенной дистальной подногтевой форме наиболее жизнеспособные грибы располагаются под ногтевой пластинкой. Материал, который направляют на исследование, должен включать не только обрезок ногтевой пластинки, но и соскоб с ногтевого ложа, из-под пластинки.

Кроме того, следует захватывать и области неизмененного ногтя, поскольку на границе между ними и пораженными участками ногтя располагаются самые активные грибы.

При проксимальной подногтевой форме брать материал трудно. В этих случаях иногда, особенно если собираются проводить гистологическое исследование или дифференциальную диагностику, предпринимают биопсию ногтя, изредка используют бормашину.

При паронихиях делают соскобы с проксимального валика и из-под него.

Во всех случаях, чтобы избежать бактериальной контаминации, перед взятием образца следует обработать ноготь этиловым спиртом.

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Микроскопическое исследование патологического материала на грибы производят в нативных и окрашенных препаратах.

Для приготовления неокрашенных препаратов полученный материал размельчают при помощи скальпеля или препаровальной иглы и помещают на середину предметного стекла. Для более четкого выявления элементов гриба производят просветление (мацерацию) материала. С этой целью прибегают к помощи различных веществ, чаще всего едкой щелочи (КОН, NaOH), которые растворяют эпидермальные чешуйки, слизь, гной, просветляют пигмент волоса и тем самым делают грибы доступными для исследования.

Микроскопическое исследование производят на обычном лабораторном микроскопе без иммерсии.

Конденсор микроскопа должен быть опущен, диафрагма сужена. В начале препарат находят на стекле при малом увеличении (40х), последующее исследование производят при большем увеличении (100х);

детально препарат изучают при увеличении 400х. Необходимо исследовать несколько препаратов с тем, чтобы увеличить надежность анализа и избежать ложноположительных результатов.

Ошибки в микроскопической диагностике грибов могут возникнуть в связи как с дефектами приготовления препарата, так и с недостаточной опытностью лаборанта.

Дефекты изготовления прежде всего бывают связаны:
с перегреванием препарата, что может привести к выпадению кристаллов щелочи, разрушению волоса и появлению мелкозернистого распада в патологическом материале.

Линейное расположение удлиненных ровных кристаллов щелочи весьма напоминает нити септированного мицелия даже на чистом стекле без патологического материала.

Дифференциально-диагностическими признаками являются исключительное однообразие кристаллов, их стекловидная прозрачность, многогранность краев и отсутствие неразрывной связи одного элемента с другим. В сомнительных случаях рекомендуется добавить к препарату капельки слегка подогретой дистиллированной воды, которые быстро растворяют кристаллы щелочи.

За элементы гриба ошибочно могут быть приняты:

— капельки жира,
— пузырьки воздуха,
— хлопчатобумажные нити одежды
— и так называемый «мозаичный грибок».

Липиды кожных покровов, жировой распад клеток и зерна кератогиалина, особенно имеющие правильную форму, могут напоминать отдельные споры гриба. Но разнообразие формы и, главное, размеров, отсутствие внутренней структуры образований (вакуоли, оболочки) говорят против грибковой природы данных элементов. Липиды также могут попасть в препарат при взятии патологического материала с недостаточно очищенного очага поражения.

Пузырьки воздуха могут напоминать споры дрожжеподобных клеток, но в отличие от последних они окружены плотной темной оболочкой, и даже самые маленькие пузырьки воздуха всегда больше клеток гриба.

Нити от ткани носков, одежды и т. п. обычно лежат отдельно от патологического материала, они всегда больше гифов, грубее и не септированы.

«Мозаичный грибок» представляет собой артефакт, который возникает в процессе кристаллизации (возможно, за счет распада холестерина). Он имеет вид сеточки или петель, очертания которых соответствуют границам роговых чешуек, в отличие от нитей мицелия он никогда не пересекает стенки клеток эпидермиса.

При этой окраске гифы и споры окрашиваются в голубой цвет.

При микроскопии обнаруживают нитевидные гифы грибов или почкующиеся клетки (рис.1).

Таким образом, микроскопия дает заключение только о грибковой природе инфекции, но не о виде гриба-возбудителя.

Конечно, результативность микроскопического исследования зависит от квалификации сотрудника лаборатории.

Следует учесть, что некоторые плесневые грибы, в том числе дерматофиты, в культуре вырастают медленно, за 2-3 нед.

Даже при соблюдении всех правил сбора материала, при хорошем оборудовании лаборатории и высокой квалификации ее персонала число положительных результатов культурального исследования очень невелико.

Это интересно:  Трещины на ногтях рук, 12 причин с фото и как их лечить

По данным зарубежной литературы, процент положительных исследований не превышает 50.
Процент положительных результатов в лучших отечественных лабораториях едва достигает 30.

Таким образом, в 2 из каждых 3 случаев онихомикоза его этиологию установить не удается.

ЛЮМИНЕСЦЕНТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

В 1925 г. Margaret и Deveze обнаружили, что волосы, пораженные некоторыми дерматофитами, дают характерное свечение в ультрафиолетовых лучах, пропущенных через фильтр Byда. Стекло Byда состоит из сульфата бария, содержит около 9% окиси никеля; оно пропускает лучи длиной 365 нм. В качестве источника ультрафиолетовых лучей можно использовать различные приборы. Природа свечения точно не установлена. Волос продолжает светиться после гибели гриба и после попыток экстрагировать флюоресцирующий материал горячей водой или холодным раствором бромида натрия. Интенсивность и характер свечения зависят от рН раствора. Полагают, что флюоресцирующая субстанция появляется в процессе взаимодействия гриба и растущего волоса.

Свечение в ультрафиолетовых лучах, пропущенных через фильтр Вуда, характерно только для волос, пораженных грибами рода Microsporum (M. canis, M. audouinii, M. ferrugineum, M. distortium, изредка M. gypseum и M. nanum), a также Trichophyton schonleinii. Волосы, пораженные микроспорумами, особенно M. canis и M. audouinii, дают наиболее яркое свечение; волосы, пораженные Т. schonleinii, имеют тусклую зеленоватую флюоресценцию.

Свечение наблюдается только в полностью пораженных грибом волосах. Его может не быть в свежих очагах поражения. В этих случаях следует эпилировать волосы из краевой, наиболее активной зоны, и свечение можно обнаружить в корневой части волос.

Люминесцентный метод можно использовать как для диагностики и контроля за эффективностью лечения у отдельных больных, так и в эпидемиологических очагах. Компактные передвижные установки удобны для обследования контактных людей в школах, детских садах и т. п.

Люминесцентное обследование необходимо производить в затемненной комнате, очаги поражения должны быть предварительно очищены от корок, остатков мази и т. п. Люминесцентный метод можно использовать для диагностики отрубевидного лишая, особенно при локализации очагов поражения на волосистой части головы. Очаги поражения при этом заболевании имеют красновато-желтое или бурое свечение. Это свечение, однако, не является строго специфичным, так как может наблюдаться при наличии перхоти на волосистой части головы и даже у здоровых людей в области устьев волосяных фолликулов на лице и верхней части туловища. Выявленные с помощью люминесцентного метода пораженные волосы должны обязательно подвергаться микроскопическому исследованию.

ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ И БИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Иммунологические методы исследования используют для выявления специфической перестройки организма и серологической диагностики грибковых заболеваний. Для обнаружения специфических антител в сыворотке пробы проводят следующие серологические реакции: агглютинации, преципитации, связывания комплемента, иммунофлюоресценции с соответствующими антигенами.

Аллергическое состояние организма больного выявляют с помощью аллергических кожных проб. Аллергены наносят на скарифицированную кожу по Пирке или втиранием в кожу по Моро, внутрикожно по Манту, а также уколом в кожу. С помощью этих проб выявляют аллергические реакции как немедленного, так и замедленного типа, что позволяет оценить состояние гуморального и клеточного иммунитета.

Для выявления специфической сенсибилизации лимфоцитов используют реакции дегрануляции базофилов, агломерации и альтерации, тест бластной трансформации, подавления миграции макрофагов и т. п.

Сопоставление результатов серологических и аллергических реакций оказывается полезным как для диагностики, так и для прогноза течения микозов.

Биологический метод. Используется для лабораторной диагностики глубоких и особо опасных микозов. Основан на заражении животных патологическим материалом от больного или культурой исследуемого гриба. Осуществляется в специальных лабораториях.

ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Гистология микозов кожи, обусловленных дерматофитами

Патоморфологические изменения в очагах поражения обусловлены внедрением грибов в роговой слой эпидермиса, волосы и ногти и ответной воспалительной реакцией кожи, которая может быть острой, подострой или хронической. Диагноз можно считать установленным только в том случае, если в гистологических препаратах обнаруживают элементы грибов. Для этого используют различные гистологические окраски, наиболее информативной является периодическая кислотная реакция (PAS), позволяющая выявить полисахариды, имеющиеся в целлюлозе и хитине клеточной стенки большинства дерматофитов (окраска по Шифу и ее модификации). Можно также использовать реакции сульфатирования и импрегнацию гистологических срезов серебром [Хмельницкий О. К., 1973; Lewer W. F. и Schaumburg-Lewerl.,1983].

Грибы в роговом слое эпидермиса, даже при использовании специальных окрасок, выявляются в небольшом количестве в виде нитей мицелия и спор. В редких случаях, когда грибов в очагах поражения много, их можно обнаружить в срезах, окрашенных гемотоксилин-эозином, в виде нежных базофильных структур в роговом слое.

Воспалительные изменения в эпидермисе могут быть различными: от незначительного внутри- и внеклеточного отека шиповатых клеток до выраженного спонгиоза. Спонгиоз обычно развивается при дисгидротических вариантах микозов стоп и кистей, клинически в этих случаях отмечаются пузырьки. Причиной этой реакции обычно является Т. mentagrophytes var. interdigitale. Иногда в эпидермисе отмечается выраженный гиперкератоз, что чаще всего наблюдается при микозе, обусловленном Т. rubrum.

Гистологические изменения в дерме неспецифичны и соответствуют острому, подострому и хроническому воспалению.

При микозе гладкой кожи, вызванном Т. rubrum, грибы иногда выявляются в пушковых волосах и волосяных фолликулах. Вокруг фолликулов развивается воспалительная реакция, которая за счет попадания в дерму грибов может приобретать гранулематозный характер. Центральная часть инфильтрата в этих случаях может подвергаться нагноению и некрозу, а периферическая состоять из лимфоцитов, гистоцитов, эпителиоидных и многоядерных гигантских клеток, внутри которых иногда обнаруживаются споры гриба. Размеры спор здесь достигают 6 мкм в диаметре, в волосе обычно не превышают 2 мкм.

При инфильтративно-нагноительной форме микозов волосистой части головы и области роста бороды и усов элементы грибов обнаруживаются в волосяном фолликуле, внутри и вокруг волоса. В волосе они определяются чуть выше зоны начала кератинизации (примерно на уровне 30 мкм). В дерме отмечают воспалительную реакцию различной интенсив­ности, наиболее выраженную при kerion Celsii. При острой гнойной реакции в составе инфильтрата отмечают большое количество нейтрофильных лейкоцитов, элементы грибов в этом случае могут полностью исчезать. При хроническом те­чении процесса инфильтрат может приобретать гранулематозный характер, в нем появляются многоядерные гигантские клетки. Для подтверждения диагноза при отсутствии в инфильтрате грибов можно использовать иммунофлюоресцентные методы окраски. Для этих целей применяют меченную флюоресцином антисыворотку к Т. mentagrophytes, которая позволяет обнаружить антигены гриба в волосе и в перифолликулярном инфильтрате.

Формирование инфильтративно-нагноительной реакции кожи при микозе волосистой части головы (kerion Celsii) и области роста бороды и усов, обусловленных грибами М. саnis, Т. tonsurans и Т. verrucosum, представляет собой проявле­ние иммунологической реакции. Об этом свидетельствуют:

1. Склонность очагов поражения к спонтанному разрешению.

2. Отсутствие элементов гриба при очень выраженной воспалительной реакции со стороны кожи при микозе, вызванном Т. verrucosum (faviforme) и Т. tonsurans.

3. Постоянная положительная реакция в ответ на внутрикожное введение трихофитина при инфильтративно-нагноительных формах микоза, вызванного зоофильными трихофитинами (например, Т. tonsurans), и отрицательная — при поверхностных микозах, обусловленных тем же Т. tonsurans.

При фавусе в роговом слое эпидермиса обнаруживается большое количество нитей мицелия и единичные споры гриба. Скутула представлена экссудатом, паракератотическими клетками эпидермиса, клетками воспалительного инфильтрата, а также нитями мицелия и спорами гриба, которые расположены преимущественно в периферической зоне скутулы. В активной стадии болезни в дерме вокруг дегенеративных волосяных фолликулов отмечается выраженный воспалительный инфильтрат, содержащий многоядерные гигантские и плазматические клетки. В старых очагах поражения волосы и сальные железы отсутствуют, имеются явления фиброза.

Гистология микозов кожи и слизистых оболочек, обусловленных дрожжеподобными грибами

При кандидозе кожи и слизистых оболочек грибы рода Candida обнаруживаются в роговом слое эпидермиса или в поверхностных слоях эпителия слизистой оболочки. Элементов гриба обычно мало, они хорошо окрашиваются PAS-peакцией или по Граму; представлены в виде нитей септированного ветвящегося мицелия, размером 2-4 мкм в диаметре, или овоидными спорами, размером 3 — 5мкм в диаметре. Диагностическое значение имеет обнаружение мицелиальной формы гриба.

При гистологическом исследовании хронического гранулематозного кандидоза кожи и слизистых оболочек элементы гриба также преимущественно обнаруживают в роговом слое эпидермиса или в самых верхних отделах эпителия слизистой оболочки, но иногда в шиповатом слое, внутри волоса и в дерме. Отмечается также выраженный гиперкератоз и папилломатоз; в дерме – густой воспалительный инфильтрат, состоящий из лимфоидных клеток, нейтрофилов, плазматических и многоядерных гигантских клеток. Инфильтрат может распространяться в подкожную жировую клетчатку.

При отрубевидном лишае в роговом слое эпидермиса обнаруживают большое количество элементов гриба в виде нежных базофильных структур, которые хорошо видны даже при окраске препаратов гемотоксилин-эозином. Грибы представлены как нитями, так и спорами.

При фолликулярной форме отрубевидного лишая отмечается скопление роговых масс и клеток воспалительного инфильтрата в расширенных устьях волосяных фолликулов. Вокруг фолликулов также отмечают воспалительный инфильтрат. При PAS-реакции сферические или овальные споры гриба, размером 2—4 мкм в диаметре, обнаруживают внутри устья волосяных фолликулов, а иногда в перифолликулярном инфильтрате. Мицелий никогда не выявляется.

Нарушение пигментации кожи у больных отрубевидным лишаем обусловлено способностью гриба Pityrosporum вырабатывать субстанцию, которая угнетает процесс пигментообразования в эпидермисе. Электронно-микроскопическое изучение биоптатов кожи с гипопигментированных участков показало, что в меланоцитах образуются очень маленькие меланосомы, которые не способны проникать в кератиноциты. В гиперпигментированных участках кожи, наоборот, меланосомы крупные и содержат большое количество меланина.

Статья написана по материалам сайтов: sovets.net, mznanie.ru, dermatology.my1.ru.

»

Помогла статья? Оцените её
1 Star2 Stars3 Stars4 Stars5 Stars
Загрузка...
Добавить комментарий

Adblock detector